影响酶催化作用的因素主要有以下几个方面：

一、底物浓度

在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度的增加而急剧上升，两者呈正比关系。随着底物浓度的进一步增高，反应速度不再成正比例增加，反应速度增加的幅度不断下降。如果继续增加底物浓度，反应速度将不再增加，表现出零级反应，此时酶的活性中心已被底物饱和。

二、酶浓度

在底物浓度足够高的条件下，酶促反应速度与酶浓度成正比。

三、温度

一般来说，在一定温度范围内，随着温度的升高，酶促反应速度加快。因为温度升高可使分子运动加快，从而增加了分子间的碰撞频率，使酶促反应的活化分子数增多。

但当温度升高到一定限度时，酶的热变性开始发生，导致酶活性下降甚至完全丧失。通常，酶促反应的最适温度是在一定条件下，酶活性最高时的温度。不同的酶最适温度不同。

四、pH

每一种酶只能在一定的pH范围内表现出活性，在某一pH下酶活性最高，这个pH称为该酶的最适pH。

pH对酶活性的影响主要是影响酶活性中心的某些必需基团、辅酶及许多底物的解离状态。在过酸或过碱的环境下，酶的空间结构被破坏，导致酶活性丧失。

五、抑制剂

抑制剂能使酶的催化活性下降，但不引起酶蛋白变性。根据抑制剂与酶结合的紧密程度不同，可分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂。

可逆性抑制剂与酶以非共价键结合，可用透析等物理方法除去抑制剂使酶恢复活性。

不可逆性抑制剂与酶以共价键结合，不能用透析等方法除去抑制剂使酶恢复活性。

不同的抑制剂作用机制不同，有的抑制剂与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍底物与酶的结合，称为竞争性抑制；有的抑制剂与酶活性中心以外的基团结合，使酶的构象改变而不能与底物结合，称为非竞争性抑制。

六、激活剂

激活剂能提高酶的活性。激活剂大多为金属离子，如镁离子、钾离子、锰离子等，也有一些小分子有机化合物。

激活剂的作用机制可能是与酶结合，改变酶的构象，从而使酶更易于与底物结合或提高酶的催化活性。