不同的抑制剂作用机制不同,有的抑制剂与底物竞争酶的活性中心,从而阻碍底物与酶的结合,称为竞争性抑制;有的抑制剂与酶活性中心以外的基团结合,使酶的构象改变而不能与底物结合,称为非竞争性抑制。
酶促化学反应中的反应物称为底物,一个酶分子在一分钟内能引起数百万个底物分子转化为产物,酶在反应过程中并不消耗。但是酶实际上是参与反应的,只是在一个反应完成后,酶分子本身立即恢复原状,又能进行下一次反应。许多实验证明,酶和底物在反应过程中形成络合物。
固定剂与甲醛不同,戊二醛的这一步反应是不可逆的,而且需要氧气的参与。由于大块的样品内部氧气供应不足,戊二醛在大块样品的内部无法形成稳定的生成物,会导致样品内部的固定效果不佳。因而在使用戊二醛固定时,小块的样品固定效果较为理想。戊二醛通过交联作用固定蛋白质的过程会伴随氢离子的释放,使样品pH值降低。为了维持pH值稳定在最佳水平,在戊二醛的固定剂中要加入足量的缓冲液。
酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用。便于运输和贮存,有利于自动化生产,但是活性降低,使用范围减小,技术还有发展空间。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术,在工业生产、化学分析和医药等方面有诱人的应用前景。