细胞分裂素的主要作用是促进细胞分裂。细胞分裂素不仅能促进细胞分裂,也可以使细胞体积扩大。但和生长素不同的是,细胞分裂素是通过细胞横向扩大增粗,而不是促进细胞纵向伸长来增大细胞体积的,它对细胞的伸长有一定的抑制效应。
胎牛血清是细胞培养中最常用的血清类型之一。它来源于胎牛,富含多种营养成分和生长因子,能够为细胞提供全面的生长支持。胎牛血清由于未接触外界环境,抗体和补体含量低,对细胞的潜在毒性小,因此广泛应用于各种细胞培养,尤其是对培养环境要求较高的细胞类型,如干细胞、淋巴细胞和神经细胞等。
灭菌的彻底性是培养基灭菌工程的首要要求。必须确保培养基中的细菌、病毒、真菌等微生物被完全杀灭,以避免微生物对实验或生产造成污染。为实现这一目标,需要严格控制灭菌过程中的温度、压力和时间等参数,确保灭菌效果达到标准。
反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase)有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子为模板,合成出一条DNA链。形成的DNA是与RNA模板互补的,因而反转录产生的DNA分子称之为cDNA。
药物的分离纯化是从合成或天然来源中获得的药物混合物中,将目标化合物纯化为高纯度的过程。这是药物研发和制造过程中非常重要的步骤,因为高纯度的药物确保了其安全性和有效性。
Western Blot显色的方法主要有以下几种: i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv. 底物DAB呈色 现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理如下(二抗用HRP标记):反应底物为过氧化物+鲁米诺,如遇到HRP,即发光,可使胶片曝光,就可洗出条带。
支持物是人工合成的交联高聚物,在水中膨胀后成为凝胶。凝胶内为内水层,凝胶周围的水为外水层。控制交联度以形成不同孔径的网状结构。交联度小的孔径大,交联度大的孔径小。