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CTAB抽提液

¥240.00
R1368

抽提植物基因组DNA

主要由CTAB、氯化钠、EDTA等组成,附送 2-巯基乙醇,临用前按比例加入。
储存条件:室温,24个月

产品简介

从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等,CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。

CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),临用前加入2-ME,使其更有效,更稳定。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途

自备材料

1、液氮\研钵或匀浆器、离心管、恒温箱或水浴锅、离心机

2、氯仿/异戊醇(24:1)、高盐TE缓冲液、异丙醇、75%乙醇、TE缓冲液

操作步骤(仅供参考)

1、取5ml适量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2-ME=50:1的比例混匀,置于15ml或其他规格的离心管中,60℃预热;如有必要可加入1~5μg/ml的RNaseA,以便去除残余的RNA。

2、称取1~1.5g或适量新鲜植物组织或叶片,用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器,将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末,将冷冻的组织转移至离心管中。

3、向粉碎后的组织中按4~5ml/g加入预热的CTAB抽提液,充分混匀,65℃温育15~60min,并不时混匀。

4、加入等体积氯仿/异戊醇(24:1),颠倒充分混匀,8000g离心5~10min,回收上层水相(即上清液,该上清液中含有所需DNA)。

5、转移上清液,加入1/2~2/3体积预冷的异丙醇,轻轻混匀,室温静置使核酸沉至管底;如果观察不到沉淀,可在室温下静置数小时至过夜。2000g离心2min,轻轻弃上清液。

6、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇,室温静置20min,4000g离心10min,轻轻弃上清液。

7、自然干燥DNA,加入适量去离子水或TE缓冲液,-20℃保存。

注意事项

1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。

2、试剂如有絮状沉淀,可于50~75℃水浴中助溶,如仍有大量沉淀应弃用。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
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