紫外线消毒:在室温20℃~25℃时,220V 30W紫外灯下方垂直位置1.0m处的253.7mm紫外线辐射强度应≥70uW/cm2,低于此值时应更换。适当数量的紫外灯,确保平均每立方米应不少于1.5W。
质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA 片段( <10kb) 且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA 和目的DNA 片段,然后体外使两者相连接,再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中,如何区分插入有外源DNA 的重组质粒和无插入而自身环化的载体分子是较为困难的。
血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分,组分很复杂,有 150 多种已知组分组分,多种未知组分。这些组分中,有些对细胞生长是有利的,有些对细胞生长是无作用的,有些对细胞生长反而是有害的。
微生物的培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖,或积累代谢产物的营养基质。广义上说,凡是支持微生物生长繁殖的介质或材料,均可作为微生物的培养基。一个适当的培养基配方,对发酵产品的产量和质量有着极大的影响。
瞬时转染:外源片段的表达时间短暂。这主要是因为外源导入的裸露的载体整合入基因组的几率非常低,所以以染色体外(episomal)形式存在,不能随细胞分裂而一同复制导致最后拷贝数被稀释导致的。而且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量,所以起初转染的质粒拷贝数极高。这就导致瞬时转染呈现一个高拷贝到低拷贝迅速降低的过程,且无法在这个系统上实现可诱导表达。
在western blot 过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。
标准物质:具有一种或多种足够均匀和很好地确定了的特性值,用以校准设备,评价 测量方法或给材料赋值的材料或物质。标准物质是一种计量标准, 都具有标准物质证书, 对每个标准值都具有给定置信水平的不确定度。
有些标准品非常昂贵,厂商只能以非常小的包装提供给客户,如1mg5mg10mg等,拿到产品时可能会觉得瓶子是空的,这种情况是由于粉末状的物质会分散在瓶壁和盖子上,而液体状物质会在瓶壁形成一层可能看不见的液层。